【中國儀器網(wǎng) 使用手冊】體視熒光顯微鏡是顯微鏡的一種,這種顯微鏡以紫外線為光源,通過觀察被測物的熒光圖像對物體作出判斷。目前,熒光體視顯微鏡是活體動物體內(nèi)熒光成像技術的核心技術,被用于研究細胞內(nèi)物質的吸收、運輸、化學物質的分布及定位等。體視熒光顯微鏡是生物、工業(yè)檢測等領域進行定性和定量研究的可靠工具之一。
體視熒光顯微鏡的使用方法:
使用前,需檢查實驗室工作環(huán)境,確保環(huán)境符合儀器說明中的使用環(huán)境標準后依照規(guī)范操作進行操作。
1.將材料片放在載物臺上,開啟熒光顯微鏡穩(wěn)壓器.然后按下啟動組點燃紫外燈,需要注意的是,點燃紫外燈后十五分鐘內(nèi)不能關閉,關閉紫外燈后三分鐘內(nèi)不得再啟動。
2. 將激發(fā)濾光片轉至v,分色片調(diào)到v,選用495或475nm阻擋濾光片;選用uvFL40、uvFL100熒光接物鏡鏡檢。
3. 在玻片上加無熒光油,依次用“40x”“100 x”調(diào)焦鏡檢,呈現(xiàn)熒光。
4. 因熒光物質受紫外光照射時隨時間的增長熒光逐漸變?nèi)?,因此鏡檢時應經(jīng)常變換視野。
注意:同樣可以使用uvFL10或uvFL20低倍鏡鏡檢材料,用低倍鏡觀察時不加無熒光油。
注意事項:
(1)嚴格按照熒光顯微鏡出廠說明書要求進行操作,不要隨意改變程序。
(2)應在暗室中進行檢查。進入暗室后,接上電源,點燃超高壓汞燈5~15min,待光源發(fā)出強光穩(wěn)定后,眼睛*適應暗室,再開始觀察標本。
(3)防止紫外線對眼睛的損害,在調(diào)整光源時應戴上防護眼鏡。
(4)檢查時間每次以1~2h為宜,超過90min,超高壓汞燈發(fā)光強度逐漸下降,熒光減弱;標本受紫外線照射3~5min后,熒光也明顯減弱;所以,多不得超過2~3h。
(5)熒光顯微鏡光源壽命有限,標本應集中檢查,以節(jié) 省時間,保護光源。天熱時,應加電扇散熱降溫,新?lián)Q燈泡應從開始就記錄使用時間。燈熄滅后欲再用時,須待燈泡充分冷卻后才能點燃。一天中應避免數(shù)次點燃光源。
(6)標本染色后立即觀察,因時間久了熒光會逐漸減弱。若將標本放在聚乙烯塑料袋中4℃保存,可延緩熒光減弱時間,防止封裱劑蒸發(fā)。
(7)熒光亮度的判斷標準: “-”—無或可見微弱熒光。“+”—僅能見明確可見的熒光。“++”—可見有明亮
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