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【儀器網(wǎng) 使用手冊(cè)】薄層色譜是一種較新的色譜法，兼具柱色譜和紙色譜的優(yōu)點(diǎn)，能快速分離和定性分析少量物質(zhì)。薄層色譜性能優(yōu)異，操作也較簡(jiǎn)單。
1.選擇吸附劑
吸附劑一般要求直徑為10～40μm，需要根據(jù)被分離物質(zhì)的性質(zhì)選擇，常用的吸附劑有以下幾種。
硅膠：微酸性極性固定相，適用于酸性、中性物質(zhì)分離
氧化鋁：堿性極性固定相，適用于堿性、中性物質(zhì)分離
纖維素：含有羥基的極性固定相，適用于分類(lèi)親水性物質(zhì)。
聚酰胺：含有酰胺基極性固定相，適用于酚類(lèi)、醇類(lèi)化合物的分離。
2.制備薄層板
薄層板的質(zhì)量將決定分離的效果，應(yīng)該盡量均勻且厚薄一致。薄層板的制備主要有兩種方法：
①將潔凈干燥的玻璃板置于鋪板器中間，在鋪板槽中倒入糊狀物，自左向右推，將糊狀物均勻地涂在玻璃板上。
②將調(diào)成糊狀物倒在玻璃板上，或用角匙舀到玻璃板上，再用玻璃棒或角匙鋪平并用手捏住玻璃板一角，輕輕碰敲桌面，使薄層表面均勻并除去 糊狀物中的氣泡。
制備完成后還需要將涂好的薄層板水平放置于室溫下晾干，然后放在烘箱內(nèi)加熱活化。(硅膠板需在烘箱內(nèi)慢慢升溫至105-110度后保溫30分鐘；氧化鋁板需在200-220度烘4小時(shí))
3.點(diǎn)樣
將待測(cè)樣品溶在極性盡可能低的溶劑中配成1%的溶液。用一支平口的細(xì)毛細(xì)管蘸取少量樣品溶液點(diǎn)在薄板上。
4.展開(kāi)
薄層層析有多種展開(kāi)方式，可分為上行、下行、雙向展開(kāi)等，這里介紹一下上行法和下行法。
上行法：在缸中加入足夠量的展開(kāi)劑，將點(diǎn)好樣品的薄層板放入展開(kāi)缸的展開(kāi)劑中，密封缸蓋，待展 開(kāi)前沿離薄板上端1cm時(shí)，取出薄層板，并用鉛筆輕輕畫(huà)下溶劑前沿，晾干。
下行法：在展開(kāi)缸的蓋子上裝一個(gè)小 鉤，將展開(kāi)的紙片鉤住，并通過(guò)一濾紙條將展 開(kāi)劑和紙片連起來(lái)。待展開(kāi)劑前沿離紙片下端 1cm時(shí)，取出紙片，并用鉛筆輕輕畫(huà)下溶劑前 沿，晾干。
5.顯色
晾干薄板溶劑后對(duì)板上的組分進(jìn)行定位。將顯色劑以噴霧方式直接噴到薄層板上可顯示不同顏色的斑點(diǎn)。此外對(duì)于無(wú)色樣品，可采用帶熒光劑的吸附劑做薄板，展開(kāi)后在紫外光下顯暗色斑點(diǎn)；對(duì)于在光學(xué)條件下不顯色的物質(zhì)，可將薄板置于含有少量碘晶體的密閉容器中，與碘作用呈棕色斑點(diǎn)。
6.Rf值計(jì)算
用尺測(cè)量原點(diǎn)到色斑中心的距離除以原點(diǎn)到溶劑前沿的距離。不同的物質(zhì)往往有著不同的Rf值，根據(jù)這個(gè)就可以簡(jiǎn)單判斷它們是否是同一物質(zhì)，但Rf值相同之后，還要進(jìn)行進(jìn)一步判斷才能確定他們是否為同一個(gè)物質(zhì)。
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第62屆中國(guó)高等教育博覽會(huì)
展會(huì)城市：重慶市展會(huì)時(shí)間：2024-11-15