全自動菌落計數(shù)儀因其使用的自動化程度高、分析結(jié)果可核對、樣品信息可留存等,已逐漸被越來越多的科研院所、衛(wèi)生疾控部分所喜愛。如何選型,才能獲得性能的菌落計數(shù)儀,并取得高性價比呢?這得從該類儀器的原理來解釋?,F(xiàn)今面市的所有全自動菌落計數(shù)儀均是采用成像分析法實現(xiàn)自動計數(shù)的,即由所組成,這二塊內(nèi)容的任何一塊上出現(xiàn)失分,都會嚴(yán)重影響計數(shù)分析結(jié)果的穩(wěn)定性。
一、成像硬件的選型
成像硬件用于獲得清晰有效的菌落圖像,以便分析計數(shù)?,F(xiàn)今的成像硬件有拍照成像的、掃描成像的。由攝像頭拍照成像的優(yōu)點是:成像速度快,能確保在0.5秒內(nèi)獲得菌落圖像。由單反相機(jī)、卡片機(jī)拍照成像的優(yōu)點是:能自動對焦、且像素分辨率一般更高,但其成像需要3~4秒的時間。然而,拍照成像的致命弱點是:成像環(huán)境中的光線強(qiáng)度,無論是暗視野,還是背光,想要做到圖像中心與邊緣保持*一致,是不可能的。從而引起平皿上亮度的不一致,這就嚴(yán)重干擾了菌落目標(biāo)的自動識別。因此,如果要選購拍照成像的,其分析軟件就一定要具有背景矯正功能,全自動菌落計數(shù)儀以便自動改善成像的效果。
掃描成像與在燈箱中營造均勻面光源不同,是將線光源通過移動變成面光源的,因此光線強(qiáng)度非常均勻,其均勻度通常比拍照燈箱的面光源要高一個數(shù)量級,從成像硬件的根本上解決了菌落目標(biāo)的亮度不勻問題,因此計數(shù)分析非常穩(wěn)定。目前,以300dpi分辨率(3482×2396像素成像)掃描6個90mm直徑平皿的速度,暗視野成像約12秒、背光成像約20秒,就其成像速度而言,與單反相機(jī)、卡片機(jī)拍照成像的速度相當(dāng)。
由于掃描成像的光線均勻度遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于拍照成像,為獲得高質(zhì)量的成像效果,以便實現(xiàn)“傻瓜式”分析。掃描成像的另一優(yōu)點是:成像分辨率可調(diào),單平皿成像較高可達(dá)4800dpi(即:25.4/4800=0.00529mm/像素),是任何拍照成像遠(yuǎn)不及的。可以預(yù)期:掃描成像將很快成為主流選擇。
二、分析軟件的選型
分析軟件是全自動菌落計數(shù)儀的另一塊核心成分。因為菌落生物的存在多樣性,在培養(yǎng)基上的表現(xiàn)或顯像不可能大體一致,針對這類變化,在分析軟件選型上要考慮:對于各類成像干擾的自動排出能力。比如:是否能自動矯正背景,等等。另外,對于嚴(yán)重粘連在一起的團(tuán)裝、鏈狀分布菌落,將其自動分割開來的水平,也是評價分析軟件的考量指標(biāo)。尤其是:對于同類菌落的“一鍵”化的智能分類計數(shù)能力,以及對于全自動菌落計數(shù)儀數(shù)分類的自動識別學(xué)習(xí)能力,更是評價分析軟件的關(guān)鍵考量指標(biāo)?,F(xiàn)在比較好的分析軟件,還集成了對6個90mm直徑平皿的抑菌圈全自動測量功能,以及對抗生素效價分析、藥敏分析功能,可避免用戶重復(fù)購置成像用的硬件。一般分析軟件都具應(yīng)具備對于分析結(jié)果和標(biāo)記圖像的保存、查看功能。
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