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更多> 凱氏定氮儀是蛋白質(zhì)含量檢測(cè)的常用儀器,廣泛用于檢測(cè)食品、糧食、油料、飼料等物品的粗蛋白含量。凱氏定氮儀使用頻率較高,因此本文就簡(jiǎn)單介紹一下它的原理與使用方法。
原理:凱氏定氮法
在有催化劑的條件下,用濃硫酸消化樣品,將有機(jī)氮都轉(zhuǎn)變成無(wú)機(jī)銨鹽,然后堿化蒸餾使氨游離,隨水蒸氣餾出并為硼酸吸收,再以硫酸或鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定,根據(jù)酸的消耗量計(jì)算出樣品中的含氮量。
使用方法:
1.消化
將樣品與濃硫酸、硫酸銅、硫酸鉀小心混合加入燒瓶中,確保樣品的*浸潤(rùn)。將燒瓶置于預(yù)熱到420℃的消化單元,消化至消化液呈透明澄清的藍(lán)綠色后,繼續(xù)加熱0.5~1 h,使樣品中的有機(jī)氮*轉(zhuǎn)化為無(wú)機(jī)氮-硫酸銨。
2.蒸餾
將消化液取下放冷,小心加入50 mL水。量取50 mL硼酸到接受瓶中,加入混合指示劑。連接好蒸餾裝置,向消解燒瓶中加人5 mL過(guò)量的氫氧化鈉溶液*中和所使用的硫酸,開(kāi)始蒸餾。使消化液中的銨根轉(zhuǎn)化為氨后餾出,為過(guò)量的硼酸吸收。
4.滴定和計(jì)算
用硫酸或鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定吸收液至終點(diǎn),計(jì)算氮含量及蛋白質(zhì)含量。然后根據(jù)試樣的不同種類(lèi),將氮含量乘以相應(yīng)的氮換算成蛋白質(zhì)的系數(shù),即可得到蛋白質(zhì)含量。
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