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MALDI-TOF應(yīng)用 | 指尖上的食源性病原體鑒定
導(dǎo)讀
指尖上的食源性病原體鑒定
目前疫情仍在肆虐，做好個(gè)人的衛(wèi)生防護(hù)非常重要。古人云：病從口入。意思是疾病多是由食物傳染。據(jù)世界衛(wèi)生組織(WHO)報(bào)道，每年發(fā)生約5.8億例由食品引起的疾病，其中約有35萬(wàn)例死亡。由于食源性細(xì)菌通常通過(guò)攝入受污染的食物進(jìn)行傳播，因此不適當(dāng)?shù)氖澄锾幚砜赡軙?huì)威脅到食物的安全性。雙手是日常生活中我們與外界接觸多的部位，也使得手成為病菌傳播的重要中轉(zhuǎn)站。不干凈的手部皮膚上每平方厘米密布著上百萬(wàn)個(gè)細(xì)菌，因此洗手能很好的去除常見(jiàn)致病菌。公共衛(wèi)生專家強(qiáng)調(diào)，應(yīng)采用肥皂液或洗手液以少量水反復(fù)揉搓后，在流動(dòng)水下沖洗干凈。
食源性致病菌
食品致病菌是可以引起食物中毒或以食品為傳播媒介的致病性細(xì)菌。致病性細(xì)菌直接或間接污染食品及水源，人經(jīng)口感染可導(dǎo)致腸道傳染病的發(fā)生及食物中毒以及畜禽傳染病的流行。食源性致病菌是導(dǎo)致食品安全問(wèn)題的重要來(lái)源。常見(jiàn)食品致病菌主要有痢疾桿菌、致病性大腸桿菌、沙門氏菌、霍亂弧菌、蠟樣芽胞桿菌、布氏桿菌、副溶血桿菌、單增李斯特菌、金黃色葡萄球菌等。
以金黃色葡萄球菌為例，金黃色葡萄球菌是常見(jiàn)的食源性致病菌，廣泛存在于自然環(huán)境中。金黃色葡萄球菌在適當(dāng)?shù)臈l件下，能夠產(chǎn)生腸毒素，引起食物中毒。近幾年，金黃色葡萄球菌引發(fā)的食物中毒報(bào)道層出不窮，由金黃色葡萄球菌引起的食物中毒占食源性微生物食物中毒事件的25%左右，金黃色葡萄球菌成為僅次于沙門氏菌和副溶血桿菌的第三大微生物致病菌。
探究指尖上的微觀秘密
受試者在含有胰蛋白大豆瓊脂和5%綿羊血的血瓊脂培養(yǎng)基上輕輕印上5個(gè)手指的指紋。將血瓊脂平板上的來(lái)自于指紋的細(xì)菌置于5%CO2培養(yǎng)箱中37℃培養(yǎng)18至48小時(shí)。然后從培養(yǎng)皿中選擇不同的單一細(xì)菌菌落轉(zhuǎn)移至不同的血瓊脂平板上進(jìn)行純細(xì)菌的培養(yǎng)。
快速鑒定過(guò)程采用島津iDPlus微生物鑒定系統(tǒng)，其工作流程由樣品制備、質(zhì)譜檢測(cè)和SARAMIS數(shù)據(jù)庫(kù)鑒定三個(gè)階段組成(圖2)。取瓊脂平板上的單菌落溶解于20μL的20%甲酸溶液中。將1μL的裂解液點(diǎn)在不銹鋼靶板上，再點(diǎn)上1μL基質(zhì)溶液。然后，混合物在室溫下干燥，使基質(zhì)和分析物分子形成共結(jié)晶。使用MALDI-TOF iDPlus Performance進(jìn)行質(zhì)譜檢測(cè)。將樣品質(zhì)譜圖與SARAMIS數(shù)據(jù)庫(kù)中的超級(jí)譜圖進(jìn)行比對(duì)來(lái)進(jìn)行鑒定。
圖2. iDPlus微生物鑒定流程圖
指尖上都有哪些細(xì)菌？
未洗手的人指紋樣本中發(fā)現(xiàn)了14種微生物 (表1)。其中，從未洗手的指紋樣品中發(fā)現(xiàn)了蠟樣芽孢桿菌(Bacillus cereus)和金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)。這兩種菌屬于疾病控制和預(yù)防中心列出的食源性致病菌。當(dāng)感染者赤手觸摸或攝入食物時(shí)，這些細(xì)菌很容易被傳播。圖3a和3b顯示蠟樣芽孢桿菌(a) 和金黃色葡萄球菌 (b) 的質(zhì)譜圖和細(xì)菌培養(yǎng)形態(tài)圖。
【重要提醒！】研究顯示，充分洗手后，在洗凈手指的指紋樣本中已找不到病原體。
表1 iDPlus平臺(tái)對(duì)受試者未洗手的指紋樣品微生物鑒定結(jié)果
圖3. 蠟樣芽孢桿菌 (a) 和金黃色葡萄球菌 (b) 的質(zhì)譜圖和細(xì)菌培養(yǎng)形態(tài)圖
“看見(jiàn)”細(xì)菌和“認(rèn)識(shí)”危害的有效手段
隱藏在微觀世界中的各類細(xì)菌幾乎布滿我們?nèi)粘Ｉ钪械乃袇^(qū)域，*的隔離和避免接觸是不現(xiàn)實(shí)的，讓大眾能夠“看見(jiàn)”和充分“認(rèn)識(shí)”細(xì)菌的所在和危害，可以引起社會(huì)衛(wèi)生觀念的提升和全民健康意識(shí)的提高，科學(xué)儀器就是此間有效的手段。島津iDPlus Performance結(jié)合SARAMIS數(shù)據(jù)庫(kù)快速可靠地用于未清洗的手指上的微生物鑒定(包括各種食源性病原體)以及洗手后不存在微生物的驗(yàn)證。正確處理食物和實(shí)施衛(wèi)生管理對(duì)于降低人與人之間傳播感染性病原體的風(fēng)險(xiǎn)非常重要。
友情提示
疫情期間，建議大家在處理食材前后、進(jìn)食前、如廁后、擰鼻涕后以及就醫(yī)和接觸動(dòng)物后及時(shí)洗手。后提供正確洗手姿勢(shì)供大家參考，口訣是“內(nèi)、外、夾、弓、大、立、腕”，謝謝！
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