一、前言:諾氟沙星(Norfloxacin,又名Noroxin、Fulgram),別名:力醇羅、氟哌酸、淋克星。其化學(xué)名為1-乙基-6-氟-1,4-二氫-4-氧代-7-(1-哌嗪基)-3-喹啉羧酸。本品為第三代喹諾酮類抗菌藥,會(huì)阻礙消化道內(nèi)致病細(xì)菌的DNA旋轉(zhuǎn)酶(DNA Gyrase)的作用,阻礙細(xì)菌DNA復(fù)制,對(duì)細(xì)菌有抑制作用。是治療腸炎痢疾的常用藥。但此藥對(duì)未成年人骨骼形成有延緩作用,會(huì)影響到發(fā)育。故禁止未成年人服用。本文主要采用液相色譜法測(cè)定諾氟沙星(C16H18FN3O3)的含量。 該方法適用于諾氟沙星。
原理: 供試品制成流動(dòng)相溶液,進(jìn)入液相色譜儀進(jìn)行色譜分離,用紫外吸收檢測(cè)器,于波長(zhǎng)278nm處檢測(cè)諾氟沙星吸收值,計(jì)算出其含量。
二、實(shí)驗(yàn)
試劑: 1.0.025mol/L磷酸溶液(用三乙胺調(diào)節(jié)pH值至3.0±0.1) 2.乙腈 3.三乙胺
儀器設(shè)備:
1.儀器
1.1液相色譜儀
1.2色譜柱 十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑,理論塔板數(shù)按環(huán)丙沙星峰計(jì)算不低于2000,諾氟沙星峰與相鄰雜質(zhì)峰間的分離度應(yīng)符合要求。
1.3紫外吸收檢測(cè)器
2.色譜條件
2.1流動(dòng)相:0.025mol/L磷酸溶液乙腈=8713.
2.2檢測(cè)波長(zhǎng):278nm
2.3柱溫:室溫
試樣制備:
1.稱取供試品 精密稱取該品25mg,置100mL量瓶中。
2.對(duì)照品溶液的制備 精密稱取適量,加流動(dòng)相溶液溶解并制成每1mL含25μg的溶液,搖勻,即得。
3.供試品溶液的制備 將供試品加0.1mol/L鹽酸溶液2mL使溶解后,加水稀釋至刻度,搖勻,精密量取5mL,置50mL量瓶中,加流動(dòng)相稀釋至刻度,搖勻,即得。 (注:“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。)
操作步驟: 分別精密吸取上述對(duì)照品溶液與供試品溶液各20μL注入液相色譜儀,用紫外吸收檢測(cè)器,于波長(zhǎng)278nm處測(cè)定環(huán)丙沙星的吸收值,計(jì)算出其含量。
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