1.細胞培養(yǎng)過程中的應用

　　細胞培養(yǎng)的一般過程主要包括四個步驟：準備、材料提取、培養(yǎng)和冷凍恢復。為了儲存細胞，特別是不易獲得的突變細胞或細胞株，冷凍細胞。冷凍溫度一般為196℃液氮溫度，細胞收集到冷凍儲存管中，加入含有保護劑(一般為二甲基亞砜或甘油)的培養(yǎng)液，以一定的冷卻速度冷凍，最后儲存在液氮中。在極低的溫度下，細胞的保存時間幾乎是無限的。

　　二、胚胎冷凍儲存技術

　　胚胎冷凍儲存技術是指在低溫環(huán)境下使用低溫保護劑儲存胚胎的技術。該技術是由20世紀下半葉人工授精技術的廣泛應用引起的。動物胚胎的冷凍保存原理是低溫降低了胚胎中的變質反應速度，溫度越小，胚胎保存時間越長。

　　目前已開發(fā)出慢速冷凍法、快速冷凍法、一步冷凍法、直接移植冷凍法、玻璃化冷凍法等多種胚胎冷凍保存方法。玻璃化冷凍法的步驟如下：

　?、賹⑴咛ピ谑覝叵掳l(fā)人25%玻璃化溶液(VS液)中預處理15分鐘。

　　②將預處理后的胚胎存放在高濃度(75%190%)的VS液中20-40分鐘。

　?、蹖⒔涍^兩步抗凍劑處理的胚胎直接儲存在液氮中。

　　此外，還可以用液氮罐儲存菌種、疫苗、骨組織、精子等成分，可以達到很好的長期儲存效果。