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無血清培養(yǎng)基的定義:
無血清培養(yǎng)基(serum free medium):是不需要添加血清就可以維持細(xì)胞在體外較長時間生長繁殖的合成培養(yǎng)基。簡單地認(rèn)為是體外細(xì)胞培養(yǎng)過程中的細(xì)胞培養(yǎng)基中不含有動物或人的血清,稱為無血清細(xì)胞培養(yǎng)基。
無血清培養(yǎng)基的特點:
配制無血清培養(yǎng)液必須使用高質(zhì)量的水,如石英玻璃蒸餾器經(jīng)三次蒸餾或超純水凈化裝置制備的水。因為無血清培養(yǎng)基缺乏了血清中天然成分中和毒素、保護細(xì)胞的大分子,既便水中的有毒物質(zhì)含量甚微,也可能對細(xì)胞產(chǎn)生致死性損害。這是無血清培養(yǎng)能否成功的關(guān)鍵因素之一。無血清培養(yǎng)基有如下優(yōu)點:
1.可避免血清批次間的質(zhì)量變動,提高細(xì)胞培養(yǎng)和實驗結(jié)果的重復(fù)性。
2.避免血清對細(xì)胞的毒性作用和血清源性污染。
3.避免血清組分對實驗研究的影響。
4.有利于體外培養(yǎng)細(xì)胞的分化。
5.可提高產(chǎn)品的表達(dá)水平并使細(xì)胞產(chǎn)品易于純化。
無血清培養(yǎng)基的應(yīng)用:
無血清培養(yǎng)基和試劑被廣泛的應(yīng)用于培養(yǎng)哺乳動物和無脊椎動物細(xì)胞以制備單克隆抗體,病毒抗原和重組蛋白等。大多數(shù)的無血清培養(yǎng)基含有向細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)運離子的轉(zhuǎn)鐵蛋白和調(diào)節(jié)葡萄糖攝取量的胰島素,以及一些蛋白質(zhì)和清蛋白,纖維蛋白,胎球蛋白等,這些蛋白在細(xì)胞培養(yǎng)中發(fā)揮各種不同的功能,如提供細(xì)胞貼壁所需的基質(zhì),抗生物反應(yīng)器剪切力,作為脂質(zhì)和其他生長分化因子的載體等。
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