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古朵生物:常用染色液的配置方法

時(shí)間:2019/12/30閱讀:1977
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  常用染色液的配置方法步驟
 
  一、呂氏(Loeffler)堿性美藍(lán)染液
 
  A液:美藍(lán)(methyleneblue)0.6 g
 
  95%酒精30 ml
 
  B液:KOH 0.01 g
 
  蒸餾水:100 ml
 
  分別配制A液和B液,配好后混合即可。
 
  二、齊氏(Ziehl)石炭酸復(fù)紅染色液
 
  A液:堿性復(fù)紅(basicfuchsin)0.3 g
 
  95%酒精 10 ml
 
  B液:石炭酸 5.0 g
 
  蒸餾水 95 ml
 
  將堿性復(fù)紅在研缽中研磨后,逐漸加入95%酒精,繼續(xù)研磨使其溶解,配成A液。
 
  將石炭酸溶解于水中,配成B液。
 
  混合A液及B液即成。通常可將此混合液稀釋5-10倍使用,稀釋液易變質(zhì)失效,一次不宜多配。
 
  三、革蘭氏(Gram)染色液
 
  1. 草酸銨結(jié)晶紫染液
 
  A液:結(jié)晶紫(crystalviolet)2 g
 
  95%酒精20ml
 
  B液:草酸銨(ammoniumoxalate)0.8 g
 
  蒸餾水80 ml
 
  混合A、B二液,靜置48小時(shí)后使用。
 
  2. 盧戈氏(Lugol)dian液
 
  dian片1.0 g
 
  dian化鉀2.0 g
 
  蒸餾水300 ml
 
  先將dian化鉀溶解在少量水中,再將dian片溶解在dian化鉀溶液中,待dian全溶后,加足水分即成。
 
  3. 95%的酒精溶液。
 
  4. 番紅復(fù)染液
 
  番紅(safranineO)2.5 g
 
  95%酒精 100 ml
 
  取上述配好的番紅酒精溶液10 ml 與80 ml 蒸餾水混勻即成。
 
  四、芽孢染色液
 
  1. 孔雀綠染液
 
  孔雀綠(malachitegreen)5 g
 
  蒸餾水 100 ml
 
  2. 番紅水溶液
 
  番紅 0.5 g
 
  蒸餾水 100 ml
 
  3. *品紅溶液
 
  堿性品紅 11 g
 
  * 100 ml
 
  制法取上述溶液10 ml 與100 ml 5%的*溶液混合,過濾備用。
 
  4. 黑色素(nigrosin)溶液
 
  水溶性黑色素10 g
 
  蒸餾水 100 ml
 
  稱取10 g 黑色素溶于100 ml 蒸餾水中,置沸水浴中30分鐘后,濾紙過濾
 
  二次,補(bǔ)加水到100 ml,加0.5 ml 甲醛,備用。
 
  五、莢膜染色液
 
  1. 黑色素水溶液
 
  黑色素 5 g
 
  蒸餾水 100 ml
 
  福爾馬林(40%甲醛)0.5 ml
 
  將黑色素在蒸餾水中煮沸5分鐘,然后加入福爾馬林作防腐劑。
 
  2. 番紅染液
 
  與革蘭氏染液中番紅復(fù)染液相同。
 
  六、鞭毛染色液
 
  A液:?jiǎn)螌幩? g
 
  FeCl3 1.5 g
 
  蒸餾水 100 ml
 
  福爾馬林(15%)2.0 ml
 
  NaOH(1%)1.0 ml
 
  配好后,當(dāng)日使用,次日效果差,第三日則不宜使用。
 
  B液:AgNO3 2 g
 
  蒸餾水 100 ml
 
  待AgNO3溶解后,取出10 ml 備用,向其余的90 ml AgNO3中滴入濃NH4ON,使之成為很濃厚的懸浮液,再繼續(xù)滴加NH4OH,直到新形成的沉淀又重新剛剛?cè)芙鉃橹?。再將備用?0ml AgNO3慢慢滴入,則出現(xiàn)薄霧,但輕輕搖動(dòng)后,薄霧狀沉淀又消失,再滴入AgNO3,直到搖動(dòng)后仍呈現(xiàn)輕微而穩(wěn)定的薄霧狀沉淀為止。如所呈霧不重,此染劑可使用一周,如霧重,則銀鹽沉淀出,不宜使用。
 
  七、富爾根氏核染色液
 
  1. 席夫氏(Schiff)試劑
 
  將1 g堿性復(fù)紅加入200 ml 煮沸的蒸餾水中,振蕩5分鐘,冷至50℃左右過濾,再加入1 mol/L HCl 20 ml,搖勻。待冷至25℃時(shí),加Na2S2O5(偏重亞硫酸鈉) 3 g,搖勻后裝在棕色瓶中,用黑紙包好,放置暗處過夜,此時(shí)試劑應(yīng)為淡黃色(如為粉紅色則不能用),再加中性活性炭過濾,濾液振蕩1分鐘后,再過濾,將此濾液置冷暗處備用(注意:過濾需在避光條件下進(jìn)行)。
 
  在整個(gè)操作過程中所用的一切器皿都需十分潔凈、干燥,以消除還原性物質(zhì)。
 
  2. Schandium固定液
 
  A液:飽和sheng汞水溶液
 
  50 ml sheng汞水溶液加95%酒精25 ml 混合即得。
 
  B液:冰醋酸
 
  取A液9毫升+B液1毫升,混勻后加熱至60℃。
 
  3. 亞硫酸水溶液
 
  10%偏重亞硫酸鈉水溶液5 ml,1 mol/L HCl 5 ml,加蒸餾水100 ml 混合即得。
 
  八、Bouin氏固定液
 
  苦wei酸飽和水溶液75 ml
 
  福爾馬林(40%甲醛)25 ml
 
  冰醋酸5 ml
 
  1 g 苦wei酸可制成75 ml 飽和水溶液。
 
  先將苦wei酸溶解成水溶液,然后再加入福爾馬林和冰醋酸搖勻即成。
 
  九、乳酸石炭酸棉藍(lán)染色液
 
  石炭酸10 g
 
  乳酸(比重1.21)10 ml
 
  甘油 20 ml
 
  蒸餾水 10 ml
 
  棉藍(lán)(cottonblue)0.02 g
 
  將石炭酸加在蒸餾水中加熱溶解,然后加入乳酸和甘油,zui后加入棉藍(lán),使其溶解即成。
 
  十、瑞氏(Wright)染色液
 
  瑞氏染料粉末 0.3 g
 
  甘油 3 ml
 
  甲醇 97 ml
 
  將染料粉末置于干燥的乳缽內(nèi)研磨,先加甘油,后加甲醇,放玻璃瓶中過夜,過濾即可。
 
  十一、美藍(lán)(Levowitz-Weber)染液
 
  在52 ml 95%酒精和44 ml 四氯乙烷的三角燒瓶中,慢慢加入0.6 g 氯化美藍(lán)(methylenebluechloride),旋搖三角燒瓶,使其溶解。放5~10℃下,12~24小時(shí),然后加入4 ml 冰醋酸。用質(zhì)量好的濾紙如WhatmanNo.42或與之同質(zhì)量的濾紙過濾。貯存于清潔的密閉容器內(nèi)。
 

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