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你了解細(xì)菌常見的染色方法及步驟嗎?

時(shí)間:2018-9-4閱讀:8921
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關(guān)于細(xì)菌常見的染色方法與步驟你了解多少嗎?具體的請看小編為您整理的一下幾種:

一、革蘭氏染色:
    革蘭氏染色是細(xì)菌學(xué)中廣泛使用的一種鑒別染色法。細(xì)菌先經(jīng)堿性染料結(jié)晶紫染色,而后經(jīng)碘液進(jìn)行媒染,之后用酒精脫色,在一定條件下有的細(xì)菌媒染后的顏色不會(huì)脫去,有的可以被脫去,前者叫做革蘭氏陽性菌,后者為革蘭氏陰性菌。為方便進(jìn)一步觀察,脫色后再用堿性蕃紅進(jìn)行復(fù)染,陽性菌仍為紫色,陰性菌染成紅色,這就是革蘭氏染色的原理。其步驟包括初染、媒染、脫色、復(fù)染四個(gè)步驟,主要步驟如圖所示:


二、莢膜染色:
    一般細(xì)菌的莢膜與染色劑的親和性低,但莢膜通透性高,因此染料可以透過莢膜使菌體著色。一般采用負(fù)染色方法使背景和菌體之間形成一透明區(qū),將菌體襯托出來便于觀察分辨。莢膜染色的步驟:加一滴6%葡萄糖水溶液在載玻片的一端,無菌操作,挑取細(xì)菌斜面上培養(yǎng)72h左右的膠質(zhì)芽孢桿菌與其混合,加1滴墨汁充分混勻,用推片法制片將菌液鋪成薄層,自然干燥,滴加1-2滴無水乙醇覆蓋涂片,固定1min,自然干燥,在已晾干的涂面上,滴加1%結(jié)晶紫染色液染色,2min后用20%的硫酸銅沖洗數(shù)次,再用自來水沖洗一次,使用擦鏡紙擦干后即可鏡檢。有莢膜的菌菌體呈紫色,背景灰黑色,莢膜不著色呈無色透明圈


 三、簡單染色:
    不同細(xì)菌或者由于觀察者所側(cè)重觀察的內(nèi)容不同,所以使用的染料也有差異,但是簡單染色的方法是一樣的。先按照上述的制片方法制片,制成需要觀察的玻片后,使用相對應(yīng)的染料滴加到玻片上的菌膜區(qū)域,以覆蓋菌膜為準(zhǔn)。按照不同染料的要求,結(jié)合所觀察的內(nèi)容確定染色時(shí)間,染色時(shí)間到達(dá)時(shí),進(jìn)行水洗,干燥等步驟。后得到的玻片加蓋蓋玻片即可進(jìn)行鏡檢。如有需要可以后續(xù)再進(jìn)行油封、蠟封等封片過程。簡單染色過程如下圖:

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