實驗?zāi)康模?br />1、學(xué)習(xí)并掌握酸奶制作的基本原理與方法。
2、了解市售酸奶的生產(chǎn)工藝。
3、掌握乳酸菌活菌計數(shù)方法與操作。
實驗原理:
乳酸菌在乳中生長繁殖,發(fā)酵分解乳糖產(chǎn)生乳酸等有機酸,導(dǎo)致乳的pH值下降,使乳酪蛋白在其等電點附近發(fā)生凝集。
乳酸菌屬于兼性厭氧微生物,在無氧條件下生長繁殖較好,實驗室條件下利用混菌培養(yǎng)的方法,盡可能讓乳酸菌在無氧條件下生長,每個單菌落代表一個微生物細胞。
實驗內(nèi)容:
(一)酸奶制作
1、10%脫脂奶粉溶解于熱水(80℃左右)中,充分?jǐn)嚢杈鶆?,配成調(diào)制乳; 2、添加蔗糖:為了緩和酸奶的酸味,改善酸奶口味,在調(diào)制乳中加人4-8%的蔗糖。 3、滅菌:方法有兩種:將乳用水浴鍋加熱加熱至90℃,保溫5min;
4、接種:往冷卻到43-45℃滅過菌的乳中加入乳酸菌,接種量為2%-5%。 5、分裝:酸奶受到振動,乳凝狀態(tài)易被破壞,因此,不能在發(fā)酵罐容器中先發(fā)酵然后再進行分裝,須是將含有乳酸菌的牛乳培養(yǎng)基先分裝到小容器中,加蓋后送入恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng),在小容器中發(fā)酵制成酸奶。
6、發(fā)酵:發(fā)酵的溫度保持在40-43 ℃,一般發(fā)酵時間為3-6h。 發(fā)酵終點的確定有兩種方法:
1)檢測發(fā)酵奶的酸度,達到65-70 T°。
2)傾斜觀察,瓶內(nèi)酸奶流動性差,而且瓶中部有細微顆粒出現(xiàn)。
7、冷卻:發(fā)酵結(jié)束,將酸奶從發(fā)酵室取出,用冷風(fēng)迅速將其冷印到10℃以下,一般2 h,使酸奶中的乳酸菌停止生長,防止酸奶酸度過高而影響口感。
8、冷藏和后熟:經(jīng)冷卻處理的酸奶,貯藏在2-5℃的冷藏室中保存。 9、感官指標(biāo)
1)色澤:色澤均勻一致,呈乳白色,或稍帶微黃色。
2)組織狀態(tài):凝塊稠密結(jié)實均勻細膩,無氣泡,允許少量乳清析出。
3)氣味:具有清香純凈的乳酸味,無酒精發(fā)酵味,無霉味和其他外來不良氣味。 (二)乳酸菌活菌檢測
①、檢測培養(yǎng)基:蛋白胨15g,牛肉膏5g,葡萄糖20g,氯化鈉5g,碳酸鈣10g,
瓊脂粉20g,水1000ml,115~121℃滅菌20min,滅菌后放置水浴52℃保溫備用。
②、稀釋:取10克樣品放入添加90ml無菌水的帶4-6顆玻璃珠的250ml三角瓶中,
搖床180rpm震蕩30min,即為10
-1
樣品溶液;再從中取1ml至添加9.0ml
無菌生理鹽水三角瓶中,稀釋至10-
2,以此類推稀釋至10-
8,即稀釋了1億倍; ③、倒培養(yǎng)平板,從上述已稀釋了1億倍的乳酸菌懸液中取1ml,在無菌操作臺上注
入9.0cm培養(yǎng)皿中,再將已經(jīng)滅了菌的保持在52℃水浴鍋中的呈溶解狀態(tài)的培養(yǎng)基,倒入15毫升左右于培養(yǎng)皿中,全部浸到培養(yǎng)皿,與菌懸液充分混合均勻(倒入培養(yǎng)基后,馬上用手轉(zhuǎn)動培養(yǎng)皿,轉(zhuǎn)動幾下,讓其混合均勻),然后等其凝固再移入培養(yǎng)箱中培養(yǎng),注意后一步倒平皿必須在超凈臺無菌操作,以免雜菌污染。每次稀釋均要換滅好菌的移液管。 ④、培養(yǎng)條件:37℃恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)48~72h。
⑤、培養(yǎng)完畢后,取出進行計數(shù),因為是稀釋了1億倍,所以一個透明圈菌落代表1
億/克,如果有200個透明圈,則是200億/克。 實驗器材及試劑:
菌種:市售酸奶 試劑:白糖 奶粉 培養(yǎng)基各成分 器材:培養(yǎng)箱、電爐、鋁鍋5L,培養(yǎng)皿,酸奶發(fā)酵瓶(自帶)
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